細(xì)胞外囊泡(EV)是細(xì)胞間傳遞信息的重要載體,在生理病理過(guò)程中發(fā)揮重要作用,在液體活檢領(lǐng)域具有巨大潛力。然而,目前EV領(lǐng)域存在命名混亂、分離及檢測(cè)技術(shù)多樣難以區(qū)分的現(xiàn)象,亟待標(biāo)準(zhǔn)化解決方案。
參考2023年12月國(guó)際細(xì)胞外囊泡學(xué)會(huì)(ISEV)專家工作組發(fā)布的國(guó)際細(xì)胞外囊泡研究指南(MISEV2023)與2024年8月中國(guó)研究型醫(yī)院學(xué)會(huì)細(xì)胞外囊泡研究與應(yīng)用專業(yè)委員會(huì)和中華醫(yī)學(xué)會(huì)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)分會(huì)分子診斷學(xué)組發(fā)布的《細(xì)胞外囊泡分離與檢測(cè)技術(shù)專家共識(shí)》,本文對(duì)以下四大EV研究關(guān)鍵注意事項(xiàng)進(jìn)行了歸納總結(jié),助力EV領(lǐng)域研究事半功倍:
(1)細(xì)胞外囊泡的科學(xué)命名;
(2)不同來(lái)源樣本準(zhǔn)備關(guān)鍵細(xì)節(jié);
(3)細(xì)胞外囊泡提取方法推薦;
(4)細(xì)胞外囊泡表征與檢測(cè)方法推薦。
細(xì)胞外囊泡(extracellular vesicle,EV)泛指各類活細(xì)胞向細(xì)胞外釋放的納米級(jí)脂質(zhì)雙分子層囊泡,無(wú)法自我復(fù)制且不含功能性細(xì)胞核。EV主動(dòng)分選了源自母體細(xì)胞的重要生物大分子,釋放至細(xì)胞外基質(zhì)后可通過(guò)血液體液循環(huán)到達(dá)各器官組織被受體細(xì)胞攝取并影響其生物學(xué)功能,作為疾病液體活檢診療標(biāo)志物具有穩(wěn)定性好、靈敏度高、組織特異性強(qiáng)三大優(yōu)勢(shì)。
然而,由于基于特定理化性質(zhì)進(jìn)行的EV分類無(wú)明確界定標(biāo)準(zhǔn)(如上下限尺寸等),許多分離方法產(chǎn)生的不同EV亞群尺寸分布也存在重疊,而基于生物發(fā)生過(guò)程亞細(xì)胞來(lái)源進(jìn)行的EV分類在以往文獻(xiàn)中存在廣泛的未經(jīng)證明亞細(xì)胞來(lái)源的使用,EV研究的開(kāi)展從研究對(duì)象的區(qū)分與選取層面便困難重重。根據(jù)MISEV2023與專家共識(shí),建議使用通用術(shù)語(yǔ)“EV”指代各類囊泡亞群,或基于EV理化性質(zhì)(如大小、密度等)對(duì)EV亞群進(jìn)行命名,避免使用定義模糊且具有誤導(dǎo)性的術(shù)語(yǔ),如根據(jù)EV生物發(fā)生過(guò)程亞細(xì)胞來(lái)源定義的“exosome”和“ectosome”等,只應(yīng)在有亞細(xì)胞來(lái)源證據(jù)支撐時(shí)使用。
細(xì)胞外顆粒命名層次結(jié)構(gòu)
EV的分離和檢測(cè)需要面對(duì)樣本成分復(fù)雜、標(biāo)志物多樣且高度異質(zhì)性和不同實(shí)驗(yàn)室重復(fù)性差三大挑戰(zhàn),需要構(gòu)建高效、便捷的EV分離技術(shù),搭建高通量、高精度的EV檢測(cè)平臺(tái),建立規(guī)范化的質(zhì)量控制體系,并利用人工智能技術(shù)提高EV檢測(cè)技術(shù)的臨床診斷效能。
青蓮百奧針對(duì)EV研究中的兩大難點(diǎn)與需求——分離與表征,提供高通量標(biāo)準(zhǔn)化解決方案,包含超速離心法、TiO2富集法與獨(dú)家專利產(chǎn)品MagicOmics EMB三大富集方案,電鏡、Western Blot標(biāo)志物檢測(cè)、納米粒徑分析(NTA)、納米流式分析四大表征方案,聯(lián)合持續(xù)深耕的高深度蛋白質(zhì)組學(xué)檢測(cè)技術(shù)、自動(dòng)化高通量前處理機(jī)器人與AI賦能的三大高級(jí)分析報(bào)告,輕松承接不同樣本來(lái)源細(xì)胞外囊泡的檢測(cè)、表征及大隊(duì)列標(biāo)志物研究項(xiàng)目。步驟雖繁必不敢省人工,試劑雖貴必不敢減物力,青蓮百奧助您在科研的海洋中乘風(fēng)破浪~
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